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高科关于羟基自由基对牡丹籽油DNA的氧化损伤实验

发布时间:2017年07月26日 关键字:牡丹籽油

高科关于羟基自由基对牡丹籽油DNA的氧化损伤实验:

    DNA受羟基自由基攻击后生成的产物在酸性条件下不仅能与硫代巴比妥酸发生反应,而且反应物与2-脱氧核糖的类似,最大吸收波长为532nm。当反应体中加入羟基自由基清除剂后,TBARS在532nm处的吸光度显著下降。因此,可以根据TBARS吸光度下降的大小来评价抗氧化剂对DNA氧化损伤的保护程度。

高科关于羟基自由基对牡丹籽油DNA的氧化损伤实验

    在 5mL具塞试管中分别加入DNA(0.8mg/mL),FeS04(1mmol/L),EDTA(lmmol/L),H2O20.2mmol/L和抗坏血酸 (1mmol/L)和不同浓度的抗氧化剂,用50mmol/LpH7.4磷酸缓冲液(PBS)补足至lmL,37℃温浴30min,温浴结束后加入10%的三氯乙酸溶液 1mL终止反应,再加入1%的硫代巴比妥酸溶液 1mL,混匀,80℃加热 30min,冷却后用 3mL正丁醇萃取,移取正丁醇萃取液在 532nm处测定吸光度。

抗氧化剂对羟基自由基致DNA氧化损伤的抑制率(%)=[(A0﹣As)/A0] ×100%

A0:模型组(空白实验);

As:样品组(加抗氧化剂实验)


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